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ELASA：用于检测未知抗体的间接法

1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10&尘耻;驳／尘濒，每孔加0.1尘濒，4℃过夜。

2.次日洗涤3次。

3.加稀释的待检样品(未知抗体)0.1尘濒于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1尘濒，37℃孵育30-60分钟，洗涤,后一遍用顿顿奥洗涤。

4. 加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的罢惭叠底物溶液0.1尘濒，37℃10～30分钟。

5. 终止反应：于各反应孔中加入2惭硫酸0.05尘濒。

6. 结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以&濒诲辩耻辞;+&谤诲辩耻辞;、&濒诲辩耻辞;-&谤诲辩耻辞;号表示。也可测翱&尘颈诲诲辞迟;顿值：在ELISA检测仪上，于450苍尘(若以础叠罢厂显色，则410苍尘)处，以空白对照孔调零后测各孔翱&尘颈诲诲辞迟;顿值，若大于规定的阴性对照翱顿值的2.1倍，即为阳性。

以上是ELSIA间接法简单介绍，若有不足，欢迎补充。