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【实验目的】

1. 学习大鼠胃溃疡(gastric ulcer)模型建立的方法。

2． 观察药物对实验性胃溃疡的防治作用。

3． 了解组织切片和HE染色方法。

【实验原理】

消化性溃疡(peptic ulcer)是由多种因素引起的一种常见病。正常情况下，机体有胃黏液、胃黏膜屏障（mucosal barrier）、黏膜细胞更新以及胃、十二指肠节律性运动功能等一系列保护性机理，使胃、肠黏膜不受损伤。但过度的精神紧张、情绪激动，会使神经系统和内分泌功能紊乱；饮食失调，如粗糙食物，骨刺等对黏膜的物理性损害；刺激性食物，如过酸、辛辣食物、酒精等；服用某些药物，如阿司匹林、消炎痛、利血平等；不规则的进食时间和细菌等等都可引起胃黏膜损伤和胃液分泌功能的失常。导致溃疡产生。酒精可刺激胃酸分泌，对胃黏膜也有直接损伤作用，短期摄入大量酒精可引起胃黏膜的损伤而产生溃疡。本实验建立酒精性胃溃疡模型，并选用药物进行治疗，从而分析溃疡产生的机制及防治作用。

【实验对象】

大鼠10只（雌雄不拘，体重200～250g）。

【实验试剂与器材】

1. 器材　大鼠手术台、哺乳动物手术器械一套、注射器、塑料管等。

2. 试剂和药品　*、氢氧化铝凝胶（1%）、洛赛克、甲氰咪胍注射液、1%甲醛溶液、生理盐水、切片机、HE染色液一套。

【实验方法与步骤】

1. 将200～250g大鼠10只(雌雄不拘)分笼饲料，禁食48h，自由饮水。

2. 手术　麻醉后将大鼠固定于手术板上，自剑突下剪开腹壁，用扁平头的镊子将肝脏内侧的胃拉出腹腔，用手术线在幽门和十二指肠的交界处做结扎。然后将胃放回原位，缝合腹部。将一外径2.5mm，长10cm左右的塑料管经口插入胃中。

3. 分组给药　随机将大鼠分成5组，每组2只。A组灌喂氢氧化铝凝胶5ml/只，B组皮下注射甲氰咪胍注射液25mg/100g体重，C组灌喂洛赛克，D组灌生理盐水为阴性对照组，E组灌生理盐水为阳性对照组。

4. 建立溃疡模型　除D组外，其余各组均于给药后，接着再灌入1ml无水乙醇，取出塑料管，将大鼠放入笼内。

5. 解剖　术后2h将大鼠用颈椎脱臼法处死。剪开腹壁缝线，结扎贲门，取出胃，沿胃大弯将胃剪开，用自来水冲洗干净内容物后平展于玻璃板上。

6. 切片及HE染色（方法见第二十章第五节）。

【观察项目】

1. 计数　用小方格（2mm×2mm）的计数板，测定实验组和对照组胃黏膜的总面积、溃疡面积及溃疡的数目。计算出每只大鼠溃疡面积占胃黏膜总面积的百分比。将实验结果计入自行设计的表格中。

2. 切片观察　观察组织切片，并将实验组和对照组的组织损伤程度进行比较。

【注意事项】

1. 术前饥饿是为了使大鼠排空胃内容物，应将大鼠关在架空的铁丝笼中，防其吃粪粒与铺垫物。

2. 塑料导管插入时一定要轻，不能用力过猛而戳破食道。

3. 用镊子翻动、夹取胃部时，动做要轻柔，以免器官组织受损。

4. 做手术中，为了防止大鼠清醒，可在大鼠鼻旁放少量棉球进行麻醉。