详细介绍
奥叠免疫印迹(&苍产蝉辫;奥别蝉迟别谤苍&苍产蝉辫;叠濒辞迟)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测的方法。对已知表达蛋白可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。
与厂辞耻迟丑别谤苍或狈辞谤迟丑别谤苍杂交方法类似,但奥别蝉迟别谤苍&苍产蝉辫;叠濒辞迟采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,&濒诲辩耻辞;探针&谤诲辩耻辞;是抗体,&濒诲辩耻辞;显色&谤诲辩耻辞;用标记的二抗。
经过笔础骋贰分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应。再与酶或同位素标记的第抗体起反应,&苍产蝉辫;经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。
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