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染色质免疫共沉淀颁贬滨笔实验

简要描述:染色质免疫共沉淀颁贬滨笔实验的原理是在活细胞状态下固定蛋白质-DNA复合物,并将其随机切断为一定长度范围内的染色质小 片段,然后通过免疫学方法沉淀此复合体,特异性地富集目的蛋白结合的DNA的片段,通过对目的片断的纯化与检测,从而获得蛋 白质与DNA相互作用的信息。

  • 更新时间:2022-12-23
  • 浏览次数:1407

详细介绍

实验原理:
在保持组蛋白和DNA联合的同时,染色质被切成很小的片断,通过运用对应于一个特定组蛋白标记的生物抗体,将目标片段(组蛋白发生特异标记的片段)沉淀下来。ChIP是利用抗原和抗体的特异性结合以及细菌蛋白质的“protein A”特异性地结合到免疫球蛋白的Fc片段的现象合用开发出来的方法(免疫磁珠结合proteinA,proteinA结合抗体Fc段,抗体结合抗原即发生特异标记的组蛋白,这里要注意组蛋白是和DNA结合的,这样就把目标组蛋白和DNA的复合体沉淀下来了)。再将组蛋白与DNA分离,用获得的DNA去做PCR分析和序列测定等检测技术,从而进一步检测哪些基因的组蛋白发生了修饰。
 

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