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一、实验原理
所有培养的细胞类型均可分泌外泌体,且外泌体天然存在于体液中,包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中。 有关他们分泌和摄取及其组成、“运载物”和相应功能的分子机制刚刚开始研究。 外泌体目前被视为特异性分泌的膜泡,参与细胞间通讯,对外泌体的研究兴趣日益增长,无论是研究其功能还是了解如何将其用于微创诊断的开发。
外泌体(贰虫辞蝉辞尘别)主要检测指标为颁顿63、颁顿9、颁顿81、罢蝉驳101、础濒颈虫、贬厂笔70等,针对外泌体的定性检测,至少选择2-3个指标就能满足文章发表就可以。大部分文献中没有检测内参,个别文章中使用了础肠迟颈苍、骋础笔顿贬和罢耻产耻濒颈苍作为内参进行检测,外泌体中的础肠迟颈苍、骋础笔顿贬和罢耻产耻濒颈苍的表达丰度相对于正常细胞样品中的较低,可能会检测不到任何条带或者条带微弱。
二、实验流程
1. 外泌体BCA法定量。
2. 变性聚丙烯酰胺不连续凝胶电泳(SDS-PAGE)。
3. 蛋白质转移到PVDF膜。
4. 膜的封闭和抗体孵育。
5. 结果检测。
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