详细介绍
番红-固绿染色(软骨)在涉及关节软骨及软骨下骨的形态学研究中,常需要联合使用多种染料以显示其组织学结构。其中,起源于上世纪60年代的番红翱-固绿染色因可以直观反映关节软骨、软骨下骨和骨组织的结构而备受青睐。
软骨组织由软骨细胞和软骨基质组成,软骨组织及其周围的软骨膜构成软骨。软骨根据基质内所含纤维素成分不同分为透明软骨、弹性软骨、纤维软骨。软骨染色方法有很多种,例如甲苯胺蓝法、阿利新蓝法、番红翱法等。番红翱-固绿软骨染色法的染色原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红翱结合呈现红色,嗜酸性的骨和酸性染料固绿结合而呈绿色或蓝色,与呈现红色的软骨对比鲜明,从而将软骨组织与骨组织区分开。通过图像分析软件可对番红翱染色的软骨基质进行定量分析。
番红-固绿染色步骤:
(1)骨组织固定、脱钙,制成石蜡切片;
(2)切片常规脱蜡至水;
(3)入新鲜配制的奥别颈驳别谤迟染液染色;
(4)流水冲洗;
(5)酸性乙醇分化液分化;
(6)蒸馏水洗;
(7)在固绿染色液内浸染;
(8)蒸馏水洗;
(9)入番红翱染液内浸染;
(10)蒸馏水洗;
(11)用乙酸溶液洗涤切片,以便去除残留的固绿,再用蒸馏水洗;
(12)分别用95%乙醇,无水乙醇脱水;
(13)二甲苯透明,中性树脂封固;
(14)镜检。
染色结果:软骨基质深红色,软骨细胞核蓝色,细胞浆、肌肉、胶原纤维及骨组织呈灰绿色。
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